Биотин Пептидес

Шта су биотиниловани пептиди?

Биотиниловани пептиди су пептиди који су модификовани да укључују део биотина. Ова модификација користи предности интеракције високог{1}}афинитета између биотина и авидина или стрептавидина, који се широко користи у биолошким и биохемијским применама. Молекул биотина је мали, стабилан и не мења значајно структуру или функцију пептида, док омогућава високо ефикасно хватање или детекцију кроз системе засноване на авидину-.

 

Цхемицал Модифицатион
Биотин се обично уводи преко НХС-биотинског (Н-хидроксисукцинимид биотин) реагенса, који реагује са примарним аминским групама које се налазе на Н-терминусу пептида или остацима лизина, формирајући стабилну амидну везу.

生物素 (биотин) 肽 (пептид)

ЦООХ НХ₂

| |

+---ЕДЦ/НХС---→ 活化羧基(активација) → 缩合(спој)

↓ ↓

Биотин{0}}ЦОНХ-Пептид

 

Афинитетна интеракција
Биотиниловани пептид се може снажно везати (Кд ~10⁻¹⁵ М) за авидин или стрептавидин, што га чини идеалним за употребу у тестовима који захтевају прецизну детекцију, хватање или имобилизацију.

Случајеви синтезе биотинилованих пептида

Пептидна секвенца: биотин-Ахк-ИКСКСКСКСКСРКСРРР-НХ2

Дужина: 11А

Purity: >95%

M.W: 1898.32

Пептидна секвенца: биотин-ИКСКСКСКСКСРКСРРР--ЕРКСКСКСДЛКСКСКСКСПВКСКСКСКСПРР

Дужина: 31А

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

Примене биотинилованих пептида

Биотиниловани пептиди су разноврсни алати у истраживању и индустрији, са широким спектром примена, укључујући:

Аффинити Пурифицатион

Користи се за пречишћавање партнера за везивање као што су протеини, антитела или нуклеинске киселине имобилизацијом биотинилованог пептида на зрнцима стрептавидина.

ЕЛИСА и Вестерн блоттинг

Биотиниловани пептиди делују као сонде за откривање специфичних интеракција када су спојени са авидин-ХРП или авидин{1}}флуоресцентним ознакама.

Површинска плазмонска резонанца (СПР)

Користи се за имобилизацију пептида на биосензорским чиповима за студије интеракција.

Друг Дисцовери

Скрининг кандидата за лекове анализом њиховог везивања за мете биотинилованих пептида.

Имунологија

Биотиниловани пептиди се користе за мапирање епитопа, проучавање интеракција антигена{0}}антитела и извођење тестова Т-ћелија.

Мапирање епитопа за развој вакцине

Прилагођени биотиниловани пептид је коришћен за идентификацију антигенских епитопа вирусног протеина, помажући у дизајнирању кандидата за вакцину.

Протеин{0}}Протеин Интерацтион Студиес

Биотиниловани пептиди имобилисани на плочама обложеним стрептавидином-омогућили су проучавање интеракција рецептора-лиганда, откривајући афинитете везивања критичне за развој лека.

Оптимизација имуноесеја

У дијагностичком тесту, биотиниловани пептиди су коришћени као антигени да би се побољшала осетљивост и специфичност ЕЛИСА теста за детекцију биомаркера болести.

 

Референце

1. Греен, НМ (1975).Авидин и стрептавидин.Биохемијски часопис, 131(3), 781-791.

2. Цхаиет, Л., & Волф, ФЈ (1964).Особине стрептавидина, протеина који везује биотин{0}} који производи Стрептомицес.Архив за биохемију и биофизику, 106(1), 1-5.

3. Финн, ФМ и Титус, Г. (1994).Биотинилација протеина у истраживању и биотехнологији.Анал Биоцхем, 218(1), 1-7.