Хибридома Целл Екпансион анд Субцлонинг Медиум 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Опис производа

产品名称

Назив производа

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Медиум за експанзију ћелија хибридома и субклонирање

货号 Кат.бр

БРС-МЕД02

规格

Спецификација

500мл/瓶

500 мЛ/боца

产品组分

Компоненте

ДМЕМ基础培养基:80%(体积比)

ДМЕМ основни медијум: 80% (в/в)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Фетални говеђи серум (ФБС, увезен): 10% (в/в)

条件培养基:10%(体积比)

Кондиционирани медијум: 10% (в/в)

Количина: 100 单位/мЛ

Пеницилин: 100 У/мЛ

Количина: 100 单位/мЛ

Стрептомицин: 100 У/мЛ

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Други адитиви: фактори пролиферације појединачних-ћелија и додаци малих молекула

保存条件

Услови складиштења

-20 степени 保存, 有效期 18 个月.

Чувати на -20 степени, рок трајања 18 месеци

使用方法

Упутство за употребу

培养基融化:

37 степени 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5мин使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Одмрзавање медијума:

Одмрзните медијум у воденом купатилу на 37 степени. Обришите спољну површину са 70% етанола и ставите у биолошки ормар за употребу.
Напомена: Појава мале количине белог флокулантног материјала након одмрзавања је нормална. Оставите медијум да одстоји 3-5 минута да се коси слеже, а затим сакупите супернатант за употребу.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻)微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5целл/孔/200ул培养基.铺

Руковање фузионим бунарима – здраве ћелије:

За фузионе бунаре са ћелијама у добром стању (нпр. средње боје нормалне или благо жуте, ћелије под микроскопом изгледају здраве, светле и нормалне величине), нежно пипетирајте горе-доле жутим врхом пипете. Избројите ћелије и плочу на 0,8-1,5 ћелија/бунарићу у 200 µЛ медијума.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Руковање фузионим бунарима – субоптималне ћелије:

За фузионе бунаре са ћелијама у субоптималним условима (нпр. средње закисељене/жуте или ћелије изгледају смежуране, тамне под микроскопом), доступне су две опције за накнадно субклонирање:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1мл本培养基的24孔板内, 在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5целл/孔/200ул培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Опција 1: Пренесите ћелије из фузионог бунара у плочу са 24 бунара која садржи 1 мЛ овог медијума. После 2-3 дана експанзије, пребројите ћелије и извршите субклонирање на 0,8-1,5 ћелија/бунарићу у 200 µЛ медијума. У овој фази, удвостручавање ћелија је ограничено, али стање ћелије је добро, што је чини идеалном за субклонирање.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ул新鲜的本培,养37% ЦО2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0.8-1.5целл/孔/200ул培养基);

Пажљиво уклоните супернатант из базена за фузију користећи жути врх пипете и додајте 200 µЛ свежег медијума по бунарчићу. Инкубирајте на 37 степени, 5% ЦО₂ 3-4 сата. Затим узмите узорке ћелија, пребројите и извршите субклонирање на 0,8–1,5 ћелија/бунарићу у 200 µЛ медијума.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Напомена: Субклони култивисани са медијумом за експанзију ћелија хибридома и субклонирање обично достижу фазу погодну за низводни скрининг или анализу 6–8 дана након-субклонирања.